NextSeq CN500基因測序儀

chanpinbanner

操作簡單,數據精確,讓您的遺傳檢測方案更簡便、更深入

了解更多?


胎兒染色體非整倍體(T13/T18/T21)檢測試劑盒(可逆末端終止測序法)

2步加樣,1步純化,3小時完成建庫

了解更多?


EZ-PALO快速建庫核心技術

創新的建庫技術,保證99.5%以上的建庫成功率

了解更多?


RUPA極速信息分析方法

獨創的測序數據分析方法,比其它方法快10倍以上

了解更多???


在線咨詢

如果FAQ未能解答您的疑問,請留言,我們將盡快為您解答。

了解更多?

技術原理

胎兒血漿游離DNA的發現

1997年,Lo等人(Lo Y. M. et al. 1997. Lancet)運用PCR法擴增母體外周血漿中的Y染色體特異DNA片段,證明在懷有男性胎兒的母血漿中存在胎兒游離DNA(cell-free fetal DNA,cffDNA)(圖1)。

血漿游離DNA

更進一步的研究發現,正常懷孕過程中cffDNA幾乎全部來源于胎盤的滋養層細胞,孕婦外周血中的cffDNA從懷孕4周左右就可以檢出,孕8周建立胎兒胎盤循環后cffDNA可以以一定的比例穩定存在于母體外周血漿中。

2010年,Lo等人又在Science Translational Medicine雜志發表文章,第一次證明母體外周血漿存在胎兒的全基因組信息,理論上證明了母體外周血漿cffDNA可以作為產前檢測的材料加以運用。


cffDNA的特點

  • 8孕周以后持續存在,孕周越大含量越高
    cffDNA在孕婦懷孕4周時便可檢出,8周后含量上升并穩定存在,且孕周越大cffDNA的含量越高。cffDNA在孕期持續存在的這一特性使其可以在早孕期、中孕期,甚至是晚孕期進行檢測,檢測孕周廣泛。
  • 以核小體形式存在,DNA穩定性好
    cffDNA在外周血中以核小體形式存在,具有良好的穩定性,實現以cffDNA作為檢測材料的可行性。
  • 半衰期短,分娩后迅速降解
    cffDNA的半衰期很短,為16.3分鐘,在正常分娩2小時后在母體外周血中已檢測不到(Lo et al. 1998. Am J Hum Genet)。cffDNA快速降解的這種特性使其成為無創產前檢測的最優檢測材料。

貝比安數學模型的建立使檢測從理論上可行

胎兒染色體數目異常會使母體血漿中游離DNA含量產生微量變化。通過新一代DNA測序技術進行深度測序并結合生物信息分析可檢測到這種變化,是貝比安無創DNA產前檢測的理論依據。

以出生缺陷中最常見的唐氏綜合征(T21)為例,通過數學模型分析cffDNA用于胎兒染色體疾病產前檢測的可行性。

正常胎兒和正常母親的21號染色體均為2條,患有唐氏綜合征的胎兒其21號染色體為3條。假定母親外周血中胎兒游離DNA的含量為20%,母體自身游離DNA占80%,為了方便說明,假定共有10份DNA拷貝。懷有正常胎兒的孕婦外周血漿的21號染色體游離DNA就是10份,2份來源于胎兒,8份來源于母親。對于懷有唐氏綜合征胎兒的孕婦來說,則不難算出其外周血漿的21號染色體游離DNA有11份,3份來源于胎兒,8份來源于母親。懷有唐氏綜合征胎兒和正常胎兒的母體外周血漿中21號染色體游離DNA比例就是11:10(見圖2)。同樣,對于胎兒游離DNA 的含量為5%的情況而言,懷有唐氏綜合征胎兒和正常胎兒的母體外周血漿中21號染色體游離DNA比例就是10.25:10。

貝比安無創DNA產前檢測技術原理

因此,無需分離胎兒來源的游離DNA,總體上懷有唐氏綜合征胎兒的孕婦外周血漿中21號染色體游離DNA的總含量將微微升高。理論上我們通過區分這一微小的差異,便可以實現利用cffDNA進行的胎兒染色體疾病產前檢測。